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Préparation des milieux de culture : L’ensemencement dans la masse

Aujourd’hui, les laboratoires de microbiologie utilisent plusieurs méthodes pour ensemencer sur une boite de Pétri : L’étalement et l’ensemencement dans la masse.

L’étalement consiste à venir déposer un échantillon sur du milieu de culture. Le but de cette méthode est d’isoler facilement les bactéries (pour l’identification par exemple). Cependant, le volume d’échantillon déposé doit être maîtrisé (entre 0,1 et 0,5 ml), si ce n’est pas le cas, il faudra vous armer de courage pour le dénombrement !

Or, avec la méthode de l’ensemencement dans la masse, vous allez pouvoir déposer un volume d’échantillon plus élevé dans la boîte de Pétri.

Les avantages de l’ensemencement dans la masse : 

◉ Permet d’être plus sensible sur les échantillons faiblement contaminés, sur lesquels il faut chercher de faibles pollutions.

◉ Méthode idéale pour les bactéries se développant en environnement microaérophilie. 

Les étapes pour réaliser l’ensemencement dans la masse : 

ÉTAPE 1 : Déposez votre échantillon de 1ml dans une boîte de Pétri vide (et stérile évidemment).

ÉTAPE 2 : Ajoutez une première couche de milieu, en général de 10 à 20ml. Attention, la température du milieu doit être maîtrisé. Si celle-ci est trop élevée, vos microorganismes n’y survivront pas !

ÉTAPE 3 : Procédez à l’agitation. Elle doit se faire en forme de « 8 » afin de répartir l’échantillon de manière homogène dans le milieu de culture.

ÉTAPE 4 : Ajoutez une deuxième couche de milieu pour s’assurer qu’aucun microorganisme ne se retrouve en surface (uniquement pour les protocoles double couche).

 

Comme vous pouvez le voir dans la vidéo, cette méthode peut se faire à l’aide d’un système automatisé (Le DISTRIWEL combiné au MEDIAWEL). Ainsi l’automatisation va vous permettre de standardiser :

➱ La température du milieu distribué

➱ Le volume distribué

➱ L’agitation en « 8 »

 

Pourquoi opter pour un distributeur en boites de Pétri Alliance Bio Expertise : 

Le DISTRIWEL est un véritable outil de productivité. Il distribue vos milieux en boites de pétri en toute autonomie. Très facile à utiliser, notamment grâce à son écran tactile, il peut enregistrer jusqu’à 40 programmes et distribuer jusqu’à 440 boites de Pétri en 30 minutes !

tutos distriwel

 

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